Catalasatest på bakterier för att ta reda på deras förmåga att bryta ner väteperoxid (med figur)
Catalasatest på bakterier för att ta reda på deras förmåga att bryta ner väteperoxid (med figur)!
Princip:
Vissa bakterier har förmågan att bryta ner väteperoxid (H 2 0 2 ) till vatten (H 2 O) och syre (0, ↑), eftersom de kan producera enzymet "katalas".
Nedbrytningen av väteperoxid genom katalas indikeras av bubblor av fri syrgas (0, ↑).
I katalastet test sätts en slinga av testbakterierna i en droppe väteperoxid som tas på en glid. Om bakterien har förmåga att producera katalas bryter den väteperoxid (H2O2) till vatten och syre. Produktion av syre resulterar i bubblor eller skumning, vilket kan märkas i droppen.
Material som krävs:
Slides, bibulous papper, inokuleringsslinga, bunsenbrännare, laminärflödeskammare, väteperoxid (3%), isolerade kolonier eller rena kulturer av bakterier.
Procedur:
1. En slang rengörs under kranvatten (Figur 7.18).
2. Glidret torkas med bibulous papper och lufttorkas.
3. En droppe väteperoxid (3%) tas i mitten av glidbanan.
4. En slinga av testbakterierna tas aseptiskt, företrädesvis i en laminärflödeskammare, med hjälp av en flamsteriliserad slinga och sätts i droppen väteperoxid på gliden. Slingan steriliseras efter varje ympning.
observationer:
1. Bubbling eller skumning uppträder i droppen: katalas-positiv.
2. Bubbling eller skumning förekommer inte i droppen: Katalas negativ.
För säkerhets skull:
En bakteriekultur från blodagarmedium kan inte användas för katalasttest, eftersom blod innehåller katalas och det ger alltid positivt resultat. Katalasiva negativa bakterier tenderar att dö i sockerfria medier, antingen för att de producerar H 2 0 2 eller eftersom H 2 0 2 ackumuleras i media när de utsätts för luft och ljus.
Därför bör lagerkulturer av sådana bakterier lagras i mörkret och där tillgången till luft är begränsad. Katalas finns i nästan alla bakterier som kan växa aerobiskt. Eftersom enzymet endast produceras av livskraftiga bakterier, kan kulturer över 24 timmar inte användas för katalasttest.
